全国高等医药院校医学检验专业规划教材 分子诊断学实验指导
作者:高基民 著
出版时间:2010年版
丛编项: 全国高等医药院校医学检验专业规划教材
内容简介
《分子诊断学实验指导》是《分子诊断学》是与第2版的配套教材。《分子诊断学实验指导》分9章,共33个实验。按核酸的分离与纯化、聚合酶链反应、核酸鉴定与分析、基因工程综合实验和其他相关分子诊断技术顺序编写,实验内容涵盖最基本的分子生物学操作技术、常用的分子生物学实验技术及分子生物学技术在临床医学检验中的应用实验技术,尚有部分较为实用的分子检验技术在附录中详细介绍。《全国高等医药院校医学检验专业规划教材:分子诊断学实验指导》可供高等院校医学本科、专科学生实验使用,也可供教师及从事临床检验工作和医学研究的技术人员参考使用。
目录
第一章 核酸的分离纯化与鉴定
一、概述
二、核酸分离制备的总原则
三、核酸提纯的主要步骤
四、核酸制备的影响因素
五、真核基因组DNA的分离纯化与测定
六、原核生物基因组DNA的分离纯化与鉴定
七、真核生物RNA的分离纯化与鉴定
实验一 蛋白酶K-酚抽提法
实验二 人血白细胞DNA的提取(NaI法)
实验三 小样本中基因组DNA的分离
实验四 碱裂解法提取质粒DNA的分离
实验五 聚乙二醇-氯化镁沉淀法纯化质粒DNA
实验六 异硫氰酸胍-酚-三氯甲烷一步法制备组织和细胞中的总RNA
实验七 氯化锂-尿素法制备总RNA
实验八 Trizol专用试剂分离RNA
实验九 磁珠分离mRNA
第二章 聚合酶链反应
一、PCR原理
二、PCR反应体系
实验十 大肠杆菌的:PCR检测
实验十一 流感病毒的RT-PCR检测
实验十二 乙型肝炎病毒(HBV)
第三章 分子克隆
实验十三 DNA的限制性酶切反应
实验十四 DNA片段的回收
实验十五 DNA的重组连接
实验十六 感受态细胞的制备和转化
实验十七 重组质粒的筛选与鉴定
实验十八 外源基因的诱导表达与检测
第四章 核酸分子杂交技术
实验十九 斑点及狭缝印迹杂交
实验二十 荧光原位杂交
第五章 DNA测序技术
实验二十一 DNA序列测定——末端终止法
实验二十二 DNA序列的自动化测序——化学降解法
第六章 蛋白质组学研究技术
实验二十三 双向凝胶电泳技术分析胃癌蛋白质组
实验二十四 免疫印迹法检测细胞中Bcl-2蛋白水平
第七章 生物芯片
实验二十五 乙型肝炎病毒基因分型芯片
实验二十六 液相芯片技术定量测定人血清AFP和CEA含量
第八章 其他分子诊断技术
实验二十七 PCR-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)
实验二十八 PCR-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)
实验二十九 等位基因特异性寡核苷酸杂交(PCR-ASO)
实验三十 甲基化特异性基因扩增
第九章 自主设计性实验
实验三十一 rhGM-CSF的制备
实验三十二 HPV的分型
实验三十三 MRSA感染的诊断
附录
附录一 核酸和蛋白质数据
附录二 常用试剂的配制
附录三 常用词汇的中英文对照
参考文献